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染色质免疫沉淀(ChIP)裂解缓冲液高盐是一种用于分子生物学研究的专用试剂,尤其适用于研究染色质中蛋白质-DNA 相互作用的 ChIP 检测。这种缓冲液经专门配制,可有效裂解细胞并溶解染色质,同时提供高浓度的盐,以提高蛋白质-DNA 结合的特异性。ChIP 高盐裂解缓冲液的成分通常包括 Tris-HCl、氯化钠(NaCl)、Triton X-100 或 NP-40、乙二胺四乙酸(EDTA)和蛋白酶抑制剂。Tris-HCl 可作为缓冲剂维持 pH 值稳定,而 NaCl 的添加浓度则高于标准裂解缓冲液。盐浓度升高会破坏蛋白质与 DNA 的非特异性相互作用,从而提高 ChIP 检测免疫沉淀步骤中蛋白质与 DNA 结合的特异性。Triton X-100 或 NP-40 等非离子去垢剂可溶解细胞膜,将染色质释放到缓冲液中,而 EDTA 可螯合二价阳离子,防止 DNA 被核酸酶降解。蛋白酶抑制剂可防止蛋白质降解,从而保留蛋白质-DNA 复合物,以便进行下游分析。在 ChIP 实验中,用 ChIP 高盐裂解缓冲液处理细胞或组织,使细胞裂解并将染色质释放到缓冲液中。然后对裂解液进行超声处理或酶解,将染色质破碎成小块。在裂解液中加入相关蛋白质的特异性抗体,以免疫沉淀蛋白质-DNA 复合物。缓冲液中的高浓度盐有助于最大限度地减少蛋白质-DNA 的非特异性相互作用,从而提高免疫沉淀的特异性。免疫沉淀后,清洗蛋白质-DNA 复合物以除去非特异性结合的 DNA,随后纯化 DNA,以便通过 qPCR、微阵列或新一代测序等技术进行分析。ChIP Lysis Buffer High Salt 对于在 ChIP 检测过程中保持蛋白质-DNA 复合物的完整性和提高蛋白质-DNA 结合的特异性至关重要。它的优化配方可确保高效的细胞裂解、染色质溶解和蛋白质-DNA 相互作用的保存,最终为 ChIP 实验带来可靠而有意义的结果。
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产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ChIP Lysis Buffer High Salt, 300 ml and 6 tablets | sc-45001 | 300 ml and 6 tablets | RMB1369.00 |