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CHAC1慢病毒激活颗粒(h) | sc-403197-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
CHAC1(ChaC 谷胱甘肽特异性 γ-谷氨酰环转移酶 1)是一种细胞质酶,催化谷胱甘肽的降解,将氧化还原稳态与细胞应激反应相连接。它在转录层面可被整合性应激反应(integrated stress response, ISR)和内质网应激信号通路诱导,包括 ATF4–CHOP 轴,并参与调控氧化应激、氨基酸可用性以及细胞命运决策。通过影响谷胱甘肽库,CHAC1 还会影响与铁死亡敏感性、线粒体功能以及应激条件下蛋白质稳态(proteostasis)相关的通路。CHAC1 表达失调与肿瘤生物学及神经退行性变相关的应激表型有关,因此是研究氧化还原驱动信号传导与细胞脆弱性的一个有用节点。
CHAC1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 CHAC1 表达。
CHAC1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在CHAC1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CHAC1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 CHAC1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。