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CEP55双切口酶质粒(h) | sc-417522-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CEP55双切口酶质粒(h2) | sc-417522-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CEP55(中心体蛋白55)编码一种有丝分裂调控因子,定位于中心体和中体(midbody),在细胞质分裂末期帮助协调最终切割(abscission)。该蛋白通过招募并作用于 ESCRT 复合体及相关中体组分,确保分裂沟正确消退并完成细胞分裂。CEP55 功能受扰会影响中心体动态、纺锤体组织和染色体稳定性,使其失调与多种癌症背景下观察到的增殖表型和基因组不稳定性相关。因此,CEP55 常用于在人源细胞模型中研究细胞周期控制、有丝分裂退出以及非整倍体形成机制。
CEP55 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CEP55 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CEP55内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CEP55的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CEP55基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。