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CEL双切口酶质粒(h) | sc-403176-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CEL双切口酶质粒(h2) | sc-403176-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 CEL 基因编码羧酸酯脂肪酶(carboxyl ester lipase, CEL),这是一种分泌型糖基化酶,最为人所知的功能是水解膳食中的胆固醇酯和甘油三酯,并促进肠道脂质吸收。CEL 的活性通过影响可用于脂蛋白组装及后续代谢信号传导的游离胆固醇、脂肪酸和单酰甘油的供给池,与脂质处理通路发生交叉。在胰腺外分泌系统中,CEL 是消化酶体系的一部分,并可影响脂质来源配体的组成,从而调节炎症与代谢反应。CEL 功能或表达的改变与脂质代谢紊乱以及胰腺或代谢相关表型有关,因此是研究脂质消化、分泌生物学及疾病相关代谢应激机制的重要靶点。
CEL 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CEL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CEL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CEL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CEL基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。