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CEACAM1CRISPR激活质粒(m) | sc-424008-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
CEACAM1CRISPR激活质粒(m2) | sc-424008-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
小鼠 Ceacam1 编码 CEACAM1,这是一种免疫球蛋白超家族的细胞黏附受体,可在细胞表面介导同源性与异源性相互作用,并有助于协调上皮组织结构及细胞间通讯。CEACAM1 通过其胞质信号基序及不同同工型的特异性功能,调控依赖磷酸化的信号网络,从而影响细胞极性、增殖控制以及免疫细胞的激活状态。CEACAM1 参与白细胞–内皮相互作用、黏膜屏障调节和组织重塑等过程,使其与炎症相关表型及上皮稳态改变相关联。CEACAM1 表达失调与免疫调控紊乱以及与癌症相关的黏附与信号改变有关,为肿瘤学、免疫学及宿主–微生物界面模型中的机制研究提供支持。
CEACAM1 CRISPR激活质粒(m)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Ceacam1的表达。
CEACAM1 CRISPR激活质粒(m)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的Ceacam1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于Ceacam1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性CEACAM1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的Ceacam1位点,并能够研究内源性位点上依赖于CEACAM1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Ceacam1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟CEACAM1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。