Date published: 2026-7-21

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CDKL5双切口酶质粒(h): sc-403409-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • CDKL5 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • CDKL5双切酶质粒(h)和CDKL5双切酶质粒(h2)编码针对CDKL5的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:CDKL5: sc-376314,通过WB, IF或者IHC分析
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    CDKL5双切口酶质粒(h)

    sc-403409-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    CDKL5双切口酶质粒(h2)

    sc-403409-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    CDKL5 编码周期蛋白依赖性激酶样蛋白 5(cyclin-dependent kinase-like 5),是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,在神经系统中高表达,支持神经元成熟、突触功能以及活动依赖性信号传导。CDKL5 调控多种依赖磷酸化的过程,影响染色质动态、基因表达程序和细胞骨架组织,因此与调控神经突起生长和突触可塑性的通路密切相关。CDKL5 的破坏或功能降低与严重的神经发育表型相关,使其成为研究神经元中激酶信号机制的重要靶点。在细胞模型中,常通过扰动 CDKL5 来探究磷酸化级联反应的改变如何影响神经网络发育以及对刺激作出反应的转录调控。

    CDKL5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CDKL5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDKL5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CDKL5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CDKL5基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。