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Cdk9双切口酶质粒(m) | sc-430774-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
细胞周期蛋白依赖性激酶9(Cdk9)是P-TEFb的催化组分,可磷酸化RNA聚合酶II的C端结构域以及负性延伸因子,从而促进转录暂停解除并实现高效的延伸转录。在小鼠细胞中,Cdk9协调对刺激作出响应的基因表达程序,整合调控细胞周期推进、DNA损伤应答与分化的多种信号输入。通过调控转录延伸,Cdk9还会影响与染色质相关的过程,并可调节细胞凋亡及应激适应通路。CDK9活性或P-TEFb募集的失衡与增殖和炎症等背景下转录调控异常相关,因此在疾病相关的基因表达网络研究中具有重要价值。
Cdk9 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Cdk9 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cdk9内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Cdk9的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Cdk9基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。