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Cdk6双切口酶质粒(h) | sc-400309-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cdk6双切口酶质粒(h2) | sc-400309-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CDK6 编码细胞周期蛋白依赖性激酶 6(Cdk6),这是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,可与 D 型细胞周期蛋白配对,磷酸化 RB 家族蛋白并促进细胞周期从 G1 期向 S 期推进。除细胞周期调控外,Cdk6 还与 MAPK 和 PI3K/AKT 通路的促有丝分裂信号输出发生关联,并参与转录程序,从而在造血及其他谱系中协调增殖与分化。CDK6 活性失调常与致癌性增殖和检查点控制异常相关;在研究生长因子依赖、细胞衰老与谱系决定等机制时,CDK6 也常与相关 CDK 一并被考察。作为连接增殖信号与细胞周期机器的整合节点,CDK6 常用于肿瘤生物学与增殖性疾病模型中的研究。
Cdk6 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CDK6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDK6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CDK6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CDK6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。