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CDD双切口酶质粒(h) | sc-403915-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CDD双切口酶质粒(h2) | sc-403915-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 **CDA** 基因编码胞苷脱氨酶(cytidine deaminase,CDD),这是一种锌依赖性酶,可分别将胞苷和脱氧胞苷脱氨转化为尿苷和脱氧尿苷。该活性参与嘧啶补救途径并维持核苷酸库稳态,从而影响 DNA 复制的保真性以及细胞对核苷供应变化的响应。CDA 的表达与酶活性可调控细胞内胞苷类似物底物的水平,并参与与核苷转运及磷酸化相关的代谢网络。CDA 功能或表达的改变与癌症生物学及血液学相关背景下核苷代谢差异有关,因此在研究代谢适应与基因毒性应激机制方面具有重要意义。
CDD 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CDA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CDA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CDA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。