Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Cdc34双切口酶质粒(h): sc-403783-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cdc34 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Cdc34双切酶质粒（h）和Cdc34双切酶质粒（h2）编码针对CDC34的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Cdc34: sc-28381，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cdc34双切口酶质粒(h) | sc-403783-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cdc34双切口酶质粒(h2) | sc-403783-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 CDC34 基因编码 Cdc34，这是一种 E2 泛素结合酶，可与 SCF（SKP1–CUL1–F-box）E3 连接酶复合体协同作用，组装 K48 连接的多聚泛素链，并促进细胞周期和 DNA 复制关键调控因子的蛋白酶体降解。通过调控诸如 CDK 抑制因子和复制许可因子等底物的泛素化，Cdc34 有助于协调 G1/S 期进程、检查点信号传导以及基因组稳定性。CDC34 活性或表达失调与蛋白质稳态改变及异常增殖程序相关，这些现象在多种与癌症相关的情境中均可观察到，因此它是研究泛素通路依赖性的一个有用节点。CDC34 也常被用于探究 Cullin-RING 连接酶（CRL）回路、泛素信号动态，以及对蛋白毒性或复制压力等应激的适应性反应。
Cdc34 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CDC34 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDC34内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CDC34的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CDC34基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。