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Cdc25C双切口酶质粒(h) | sc-400833-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cdc25C双切口酶质粒(h2) | sc-400833-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CDC25C 编码 Cdc25C,这是一种双特异性磷酸酶,可通过去除抑制性磷酸化来激活 CDK1–Cyclin B 复合物,从而促进 G2/M 转换并进入有丝分裂。其活性受到检查点信号的严格调控,包括 ATR/CHK1 以及与 p53 相关的通路;在 DNA 损伤或复制压力下,这些通路会抑制 Cdc25C,以维持基因组完整性。CDC25C 调控异常会扰乱有丝分裂时序并促成染色体不稳定性,因此与肿瘤相关的细胞周期失调研究密切相关。Cdc25C 还与 14-3-3 蛋白介导的隔离以及磷酸化依赖的亚细胞定位相互关联,为解析检查点适应与有丝分裂控制提供了机制切入点。
Cdc25C 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CDC25C 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDC25C内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CDC25C的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CDC25C基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。