Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CD88 Antibody (R63): sc-53797. Western blot analysis of CD88 expression in Jurkat (A), RAW 264.7 (B), EOC 20 (C) and NIH/3T3 (D) whole cell lysates.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CD88双切口酶质粒(h): sc-401968-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CD88 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CD88双切酶质粒（h）和CD88双切酶质粒（h2）编码针对C5AR1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CD88: sc-271949，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CD88双切口酶质粒(h) | sc-401968-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD88双切口酶质粒(h2) | sc-401968-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
C5AR1 编码 CD88，这是一种七次跨膜的 G 蛋白偶联受体（GPCR），可结合补体过敏毒素 C5a，并在髓系及其他具有免疫应答能力的细胞类型中协调趋化、脱颗粒、氧化爆发以及细胞因子释放。CD88 信号可激活依赖 Gαi 的通路，包括 PI3K–AKT、MAPK/ERK 以及钙动员，从而将补体激活与白细胞转运和炎症相关的转录程序整合起来。通过与 Toll 样受体信号及 Fc 受体通路的串扰，C5AR1 影响先天免疫的放大以及炎症消退的动态过程。C5a–CD88 活性的失调已被认为与多种炎症性和免疫介导性疾病相关，并常在组织损伤、感染以及肿瘤相关炎症的模型中被研究。
CD88 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 C5AR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对C5AR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏C5AR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了C5AR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。