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CD83双切口酶质粒(h) | sc-401864-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
CD83 编码一种 I 型跨膜的免疫球蛋白超家族糖蛋白,在树突状细胞成熟过程中会被快速诱导表达,同时也表达于被激活的 B 细胞以及部分 T 细胞亚群。CD83 通过调控免疫突触的形成、共刺激信号传导,以及细胞表面免疫受体的稳定性与转运,从而促进抗原呈递与 T 细胞启动;这些作用与 NF-κB 相关的激活程序及细胞因子驱动的分化通路相交汇。因此,CD83 常被用于研究免疫耐受、炎症信号以及适应性免疫调控等情境。CD83 表达水平及其脱落(shed)模式的改变与自身免疫、慢性炎症以及肿瘤—免疫相互作用中的免疫失衡有关,这也支持其作为免疫学研究中的机制性标志物。
CD83 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CD83 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CD83内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CD83的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CD83基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。