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CD74双切口酶质粒(h) | sc-400279-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD74双切口酶质粒(h2) | sc-400279-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CD74 编码不变链(Ii),是一种 II 型跨膜蛋白,在抗原呈递细胞中作为 MHC II 类分子的关键伴侣蛋白发挥作用。它在内质网中占据肽结合槽,并引导 MHC II 经由内体区室进行转运,从而促进肽段装载并将其呈递给 CD4+ T 细胞,参与适应性免疫信号传导。CD74 还作为巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)的细胞表面受体组分之一,将其与 NF-κB、MAPK 等下游通路连接起来,这些通路调控炎症、细胞存活和免疫细胞活化。CD74 表达与信号传导的失衡与免疫介导的病理过程有关,并常在血液系统恶性肿瘤及炎症性微环境的研究中被重点关注。
CD74 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CD74 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CD74内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CD74的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CD74基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。