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CD71/TFRC/Transferrin Receptor双切口酶质粒(h) | sc-400310-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD71/TFRC/Transferrin Receptor双切口酶质粒(h2) | sc-400310-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TFRC(CD71)编码转铁蛋白受体,这是一种II型膜糖蛋白,介导网格蛋白依赖性的内吞作用,将与转铁蛋白结合的铁摄入细胞,从而维持细胞铁稳态。受体的转运与回收与内体酸化、铁释放以及多种依赖铁的过程相互耦联,这些过程包括线粒体呼吸、血红素合成,以及为DNA合成提供所需的核糖核苷酸还原酶活性。TFRC的表达受铁反应元件/铁调控蛋白(IRE/IRP)信号通路严格调控,并且由于增殖细胞对铁需求升高,TFRC表达常与细胞增殖状态相关。TFRC相关的铁处理失衡在贫血、神经退行性疾病、感染生物学以及肿瘤细胞代谢等研究领域受到关注,因为铁摄取的改变可影响氧化应激水平和细胞生长程序。
CD71/TFRC/Transferrin Receptor 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TFRC 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TFRC内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TFRC的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TFRC基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。