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CD69双切口酶质粒(h) | sc-416315-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD69双切口酶质粒(h2) | sc-416315-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CD69 编码一种早期活化抗原,表达于 T 细胞、B 细胞、NK 细胞及其他白细胞的细胞表面,作为 C 型凝集素受体发挥作用,能够快速标记免疫活化状态。CD69 参与信号传导与细胞—细胞相互作用相关程序,影响淋巴细胞的滞留与迁移,包括调控鞘氨醇-1-磷酸受体(S1PR1)依赖的外出(egress)过程,并协同组织驻留的建立。由于其对活化阈值、细胞因子反应以及免疫突触动态的影响,CD69 常被用于研究调控炎症、免疫耐受与宿主防御的相关通路。在免疫介导性疾病与肿瘤免疫学等背景中已有多种 CD69 表达异常模式的报道,这也支持其作为机制性标志物与白细胞生物学研究中的功能节点。
CD69 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CD69 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CD69内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CD69的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CD69基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。