Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CD63 Antibody (E-12): sc-365604. Western blot analysis of CD63 expression in Hs68 whole cell lysate.
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CD63双切口酶质粒(h): sc-400061-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CD63 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CD63双切酶质粒（h）和CD63双切酶质粒（h2）编码针对CD63的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CD63: sc-365604，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CD63双切口酶质粒(h) | sc-400061-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD63双切口酶质粒(h2) | sc-400061-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CD63（四跨膜蛋白-30，tetraspanin-30）是一种广泛表达的四跨膜蛋白，富集于晚期内体、溶酶体和外泌体中，在这些部位它有助于组织“四跨膜蛋白富集微区”，从而协调膜蛋白的运输与信号传导。通过与整合素和免疫受体协同作用，CD63 调控内体成熟、囊泡停靠与融合、抗原加工以及与细胞黏附相关的通路。CD63 常被用作细胞外囊泡标志物，并参与免疫调节、病毒进入/出芽，以及分泌颗粒中蛋白酶活性的调控等过程。CD63 表达量或定位的改变与炎症反应以及癌细胞侵袭/转移表型相关，因此推动了对其在膜动力学与细胞间通讯中作用机制的研究。
CD63 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CD63 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CD63内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CD63的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CD63基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。