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CD55双切口酶质粒(h) | sc-400738-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD55双切口酶质粒(h2) | sc-400738-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD55(衰变加速因子,DAF)是一种通过 GPI 锚定于细胞膜的补体调控蛋白,可通过加速 C3/C5 转化酶的解离,保护宿主细胞免受补体介导的损伤。通过限制下游效应复合物的形成,CD55 有助于塑造先天免疫监视,并影响细胞表面及微环境中的炎症信号传导。CD55 表达或功能的改变与补体活化失衡相关,已在溶血性疾病、自身免疫以及肿瘤免疫逃逸等研究背景中被广泛探讨。在体外实验中,CD55 常被用作标志物及功能节点,用于检测补体敏感性、膜蛋白转运以及免疫细胞相互作用。
CD55 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CD55 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CD55内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CD55的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CD55基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。