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CD42d双切口酶质粒(h) | sc-404793-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD42d双切口酶质粒(h2) | sc-404793-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
GP5 编码血小板糖蛋白 V(CD42d),它是血小板表面 GPIb-IX-V 受体复合物的组成部分。该复合物与 von Willebrand 因子(vWF)的结合协同作用,在高剪切力条件下介导血小板的初始捕获/系留,并支持凝血酶依赖性的血小板激活。通过这些相互作用,CD42d 参与止血性黏附、机械力信号转导以及下游信号事件,从而协调血小板颗粒释放和整合素激活。GPIb-IX-V 复合物的表达或功能异常与遗传性血小板黏附缺陷相关,并可影响血栓与出血表型,因此 GP5 是解析血小板生物学及与凝血相关炎症过程的有用基因位点。
CD42d 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GP5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GP5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GP5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GP5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。