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CD42c双切口酶质粒(h) | sc-403712-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD42c双切口酶质粒(h2) | sc-403712-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
GP1BB 编码血小板糖蛋白 Ib β 链(CD42c),它是 GPIb-IX-V 受体复合物的关键组成部分,在高剪切应力条件下介导血小板与血管性血友病因子(von Willebrand factor, vWF)的捕获与黏附。通过与细胞骨架适配蛋白以及 Src 家族激酶、PI3K 依赖性通路等信号节点的协同作用,CD42c 参与血小板活化、促凝反应和血栓形成。GP1BB 的遗传破坏或表达异常会扰乱受体在细胞表面的组装与血小板功能,因此与以巨型血小板减少和出血表型为特征的遗传性血小板疾病密切相关。由此,GP1BB 被广泛用于研究血小板生成、止血过程,以及与血管生物学和炎症性血栓研究相关的力学信号转导模型。
CD42c 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GP1BB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GP1BB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GP1BB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GP1BB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。