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CD42b双切口酶质粒(h) | sc-401273-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD42b双切口酶质粒(h2) | sc-401273-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
GP1BA 编码血小板糖蛋白 Ib α(CD42b),它是 GPIb-IX-V 受体复合物的关键亚基,在高剪切力条件下介导血小板与 von Willebrand 因子(vWF)的初始黏附。由 CD42b 驱动的黏附会启动一系列信号程序,协调血小板活化、细胞骨架重塑以及整合素的参与,从而将止血反应与血栓炎症通路连接起来。这一轴线还与机械力转导以及受体近端信号网络相互交织,共同调控血小板聚集与血栓稳定性。GP1BA 的遗传或功能扰动与遗传性血小板黏附缺陷以及出血或血栓相关表型改变有关,因此是开展血小板生物学机制研究的一个重要靶点。
CD42b 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GP1BA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GP1BA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GP1BA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GP1BA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。