Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CD33 Antibody (B-3): sc-514119. Western blot analysis of CD33 expression in LADMAC whole cell lysate.
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CD33 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m2): sc-419543-KO-2
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CD33 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m2） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在CD33基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CD33: sc-53199，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CD33 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m2) | sc-419543-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
概述
Cd33 编码 CD33，这是一种可结合唾液酸的免疫球蛋白样凝集素（Siglec），主要表达于髓系谱系细胞。在这些细胞中，CD33 作为抑制性受体发挥作用，帮助精细调控先天免疫的激活程度。通过免疫受体酪氨酸抑制基序（ITIM），CD33 可募集 SHP-1/SHP-2 等磷酸酶，从而减弱模式识别受体及其他激活信号下游的传导，进而影响细胞因子产生、吞噬作用以及炎症反应的基础设定点。在小鼠研究体系中，Cd33 常被用于解析小胶质细胞和巨噬细胞的调控回路，包括依赖唾液酸化的“自我”识别以及糖基-免疫检查点。CD33 活性与表达的改变与神经炎症及其他免疫介导疾病背景下的髓系反应失衡相关，因此是研究免疫稳态机制的一个重要节点。
CD33 CRISPR/Cas9 KO质粒（m2）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Cd33基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Cd33基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Cd33开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使CD33蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Cd33缺失的细胞模型，用于CD33信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 CD33 功能至关重要的 Cd33 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Cd33 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 CD33 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 CD33 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Cd33 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 CD33 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 CD33 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Cd33同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Cd33靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。