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CD300E慢病毒激活颗粒(h) | sc-415572-LAC | 200 µl | CNY3422.00 | |||
CD300E慢病毒激活颗粒(h2) | sc-415572-LAC-2 | 200 µl | CNY3422.00 |
CD300E(又称 IREM-2)编码一种免疫球蛋白超家族受体,主要表达于髓系谱系细胞,在其中调控先天免疫激活与炎症信号传导。CD300E 的受体结合可通过依赖接头蛋白的通路耦联,启动细胞激活程序,包括细胞因子产生、吞噬反应以及抗原呈递细胞成熟,并与 NF-κB 和 MAPK 相关过程发生交叉。髓系受体信号的调控异常与免疫失衡状态及炎症性疾病的生物学机制相关,因此在白细胞活化与组织免疫微环境研究中,常评估 CD300E 的表达模式。作为细胞表面免疫受体,CD300E 也可用于解析激活型受体网络如何塑造巨噬细胞与树突状细胞的功能极化。
CD300E 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 CD300E 表达。
CD300E 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在CD300E转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CD300E表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 CD300E 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。