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CD274/PD-L1慢病毒激活颗粒(h) | sc-401140-LAC | 200 µl | CNY3422.00 | |||
CD274/PD-L1慢病毒激活颗粒(h2) | sc-401140-LAC-2 | 200 µl | CNY3422.00 |
CD274 编码 PD-L1(CD274),这是一种 I 型跨膜免疫检查点配体,可与 PD-1(PDCD1)结合,从而调节 T 细胞活化、细胞因子产生以及外周耐受。PD-L1 的表达可在炎症信号(如 IFN-γ)刺激下通过 JAK/STAT 通路被诱导,并可受包括 PI3K–AKT–mTOR 和 MAPK 在内的致癌通路调控,从而将免疫信号与细胞应激反应联系起来。通过与 PD-1 的相互作用,PD-L1 有助于减弱抗原特异性免疫反应,并塑造免疫监视与免疫逃逸之间的平衡。PD-L1 调控异常与免疫功能紊乱相关,并在肿瘤免疫学、慢性感染及自身免疫相关模型中被广泛研究。
CD274/PD-L1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 CD274 表达。
CD274/PD-L1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在CD274转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CD274/PD-L1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 CD274 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。