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CD24CRISPR激活质粒(h) | sc-418762-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
CD24 编码一种以糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定于细胞表面、并高度糖基化的蛋白,可调节细胞–细胞及细胞–基质相互作用,并塑造免疫信号传导。CD24 通过与唾液酸结合型免疫球蛋白样凝集素(Siglecs)的相互作用参与多种过程,包括淋巴细胞活化、黏附动态调控以及炎症反应的调节,从而影响先天免疫检查点及其下游信号程序。其表达受发育过程调控,且常与上皮与造血谱系状态相关,因此可作为细胞分化与表型异质性的有用标志物。CD24 丰度的改变与免疫失衡及肿瘤生物学情境有关,为在模型体系中研究免疫逃逸机制、与转移相关的性状以及与微环境的串扰提供支持。
CD24 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CD24的表达。
CD24 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的CD24基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于CD24转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性CD24表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的CD24位点,并能够研究内源性位点上依赖于CD24的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CD24表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟CD24通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。