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CD14双切口酶质粒(m) | sc-419531-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD14双切口酶质粒(m2) | sc-419531-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Cd14 基因编码 CD14,这是一种通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定于细胞膜的共受体,能够结合细菌脂多糖(LPS)及其他病原体相关配体,从而促进先天免疫识别。CD14 与 TLR4–MD-2 复合体协同作用,增强 MyD88 依赖型和 TRIF 依赖型信号传导,促进 NF-κB 与 IRF 的激活,并引发下游细胞因子和 I 型干扰素反应。它还参与配体内吞、内体运输,并在髓系细胞中调控与炎症小体相邻的炎症程序。CD14 信号失调与异常炎症状态相关,常用于研究类脓毒症反应、代谢性炎症以及神经炎症过程等模型。
CD14 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Cd14 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cd14内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Cd14的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Cd14基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。