非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CD133 抗体 (E-11): sc-365537. 非转染 293T: sc-117752 (A), 人 CD133 转染 293T: sc-175470 (B), Y79 (C), NTERA-2 cl. D1 (D) 和 Caco-2 (E) 全细胞裂解液及人唾液腺组织提取物 (F) 中 CD133 表达的 Western 印迹分析. 所用检测试剂: m-IgG1 BP-HRP: sc-525408.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CD133双切口酶质粒(h): sc-418263-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CD133 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CD133双切酶质粒（h）和CD133双切酶质粒（h2）编码针对PROM1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CD133: sc-365537，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CD133双切口酶质粒(h) | sc-418263-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD133双切口酶质粒(h2) | sc-418263-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PROM1 编码 CD133（prominin-1），这是一种五次跨膜糖蛋白，富集于质膜突起和微绒毛等结构中，有助于膜结构的组织与细胞极性的建立。在人体组织中，CD133 常用于标记具有干细胞/祖细胞样特征的细胞群，并被广泛用于研究细胞状态异质性、自我更新程序以及分化轨迹。PROM1 相关生物学与 Wnt/β-连环蛋白、Notch 和 PI3K–AKT 等通路的信号与转录程序相互交叉，同时也与上皮结构的维持及囊泡动力学等过程相关。多种恶性肿瘤以及组织重塑情境中均有 CD133 表达改变的报道，这支持其在研究肿瘤起始、侵袭以及治疗耐受亚群方面的相关性，但并不意味着其具有临床应用价值。
CD133 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PROM1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PROM1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PROM1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PROM1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。