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CCDC69慢病毒激活颗粒(m) | sc-424629-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
小鼠基因 Ccdc69 编码 CCDC69,这是一种含卷曲螺旋(coiled-coil)结构域的蛋白,被认为参与细胞骨架组织与有丝分裂进程;已有报道提示其与中心体和纺锤体相关过程有关,有助于维持基因组稳定性。卷曲螺旋支架蛋白通常负责协调多蛋白复合体的组装,以调控微管动力学、检查点信号传导以及随细胞周期变化的结构重塑。这些通路的调控一旦发生改变,可能影响细胞增殖、非整倍体形成与应激反应,因此 Ccdc69 也成为研究“细胞分裂保真度如何与更广泛的细胞稳态相连接”的一个关注点。在小鼠模型体系中,通过调控 Ccdc69 的表达可以用于探究其对细胞周期控制及相关疾病研究表型的通路层面影响,但不应据此推断任何临床结局。
CCDC69 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Ccdc69 表达。
CCDC69 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Ccdc69转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CCDC69表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Ccdc69 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。