
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CCDC109A双切口酶质粒(h) | sc-413850-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CCDC109A双切口酶质粒(h2) | sc-413850-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MCU(CCDC109A)编码线粒体钙单向转运体(mitochondrial calcium uniporter)复合物中形成孔道的亚基,该复合物介导 Ca²⁺ 穿过线粒体内膜的摄取。通过塑造线粒体 Ca²⁺ 的瞬态变化,MCU 将胞质信号与氧化磷酸化、三羧酸(TCA)循环脱氢酶的激活以及活性氧(ROS)稳态联系起来,从而影响 ATP 生成与代谢灵活性。MCU 依赖的 Ca²⁺ 处理还与线粒体通透性转换以及凋亡相关通路发生交互,进而影响应激反应与细胞命运决定。MCU 活性失衡与多种情境下的生物能量学与 Ca²⁺ 信号异常相关,包括心脏-代谢功能障碍、神经退行性变以及肿瘤生物学,因此在阐明线粒体信号机制的研究中常被作为重要靶点。
CCDC109A 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MCU 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MCU内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MCU的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MCU基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。