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CBX7CRISPR激活质粒(h) | sc-402903-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
CBX7CRISPR激活质粒(h2) | sc-402903-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
CBX7(chromobox 7)是一种多梳(Polycomb)组蛋白,在经典PRC1复合体中作为染色质“读取器”发挥作用,能够识别H3K27me3并帮助维持稳定的转录抑制。通过多梳介导的表观遗传调控,CBX7影响细胞周期控制、谱系命运决定、细胞衰老以及细胞身份程序的长期维持。CBX7表达改变或PRC1活性失调与多种癌症背景下出现的异常基因沉默网络有关,也与发育及衰老相关表型有关。作为核内染色质调控因子,CBX7常用于研究调控转录记忆与染色质压缩的通路。
CBX7 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CBX7的表达。
CBX7 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的CBX7基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于CBX7转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性CBX7表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的CBX7位点,并能够研究内源性位点上依赖于CBX7的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CBX7表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟CBX7通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。