CBP20双切口酶质粒(h): sc-404124-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CBP20 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CBP20双切酶质粒（h）和CBP20双切酶质粒（h2）编码针对NCBP2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CBP20: sc-137123，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CBP20双切口酶质粒(h) | sc-404124-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CBP20双切口酶质粒(h2) | sc-404124-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NCBP2 编码 CBP20，它是核内帽结合复合体（nuclear cap-binding complex, CBC）的小亚基，负责识别新生 RNA 聚合酶 II 转录本 5′ 端的 7-甲基鸟苷帽结构。CBP20 与 NCBP1/CBP80 协同，将帽结构识别与共转录的 RNA 加工过程耦联起来，包括前体 mRNA 剪接、3′ 端形成、通过 TREX 依赖通路介导的 RNA 输出，以及无义介导的 mRNA 降解（nonsense-mediated mRNA decay, NMD）等监控机制。通过这些功能，CBP20 有助于协调影响细胞周期调控、应激反应以及与 RNA 代谢相关的先天免疫信号传导的基因表达程序。与帽依赖性 RNA 加工与输出相关的失调在多种疾病相关的转录组状态中常见，因此 NCBP2 是研究 RNA 生物发生以及核—胞质转运机制的一个重要靶点。
CBP20 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 NCBP2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NCBP2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏NCBP2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了NCBP2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。