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CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2CRISPR激活质粒(h) | sc-401054-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2CRISPR激活质粒(h2) | sc-401054-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
CNR2 编码大麻素受体 2(CB2),这是一种与 Gi/o 蛋白偶联的 GPCR,主要表达于免疫与造血细胞谱系,可调控炎症基调以及免疫细胞迁移。CB2 被激活后可抑制腺苷酸环化酶,从而降低 cAMP/PKA 信号,并可进一步启动 MAPK/ERK 和 PI3K/AKT 通路,进而影响细胞因子产生、趋化以及细胞存活等程序。CB2 信号与脂质介质网络及内源性大麻素代谢相互交叉,影响巨噬细胞与小胶质细胞的激活状态,以及更广泛的先天与适应性免疫反应。CNR2 表达或信号传导失调与免疫介导的炎症、神经炎症过程以及肿瘤—免疫微环境动态相关,因此在免疫学与神经生物学研究中具有作为机制性靶点的价值。
CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CNR2的表达。
CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的CNR2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于CNR2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的CNR2位点,并能够研究内源性位点上依赖于CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CNR2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。