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caveolin-1双切口酶质粒(m) | sc-419479-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
caveolin-1双切口酶质粒(m2) | sc-419479-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Cav1 基因编码洞蛋白-1(caveolin-1),它是小窝(caveolae)的主要结构组成成分,能够支架化膜微域并在质膜上协调信号转导。洞蛋白-1 调控内吞作用与机械信号转导,影响胆固醇稳态与脂质运输,并塑造多条通路的信号输出,例如 Src 家族激酶、eNOS/NO 信号、TGF-β 以及整合素依赖的黏着斑动力学。通过这些作用,Cav1 影响细胞骨架重塑、细胞迁移和细胞外基质相互作用,这些过程常在血管生物学、纤维化模型以及肿瘤微环境研究中被重点考察。洞蛋白-1 的表达量或定位改变与内皮功能失调、脂肪与代谢表型异常,以及在癌症研究中因情境而异的增殖与侵袭变化有关。
caveolin-1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Cav1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cav1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Cav1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Cav1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。