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cathepsin H双切口酶质粒(h) | sc-402601-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
cathepsin H双切口酶质粒(h2) | sc-402601-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CTSH 编码组织蛋白酶 H(cathepsin H),这是一种溶酶体半胱氨酸蛋白酶,主要作为氨肽酶发挥作用,并参与细胞内蛋白质周转的末端步骤。它参与内体-溶酶体运输与蛋白水解加工,在特定细胞情境下影响抗原加工、细胞外基质重塑,以及对肽类激素或生长因子可用性的调控。组织蛋白酶活性失衡与蛋白稳态异常、炎症信号改变和细胞侵袭性行为相关,因此 CTSH 常被用作研究溶酶体依赖性应激反应的靶点。CTSH 的表达与活性也常在肿瘤生物学和免疫细胞功能研究中被考察,因为溶酶体蛋白酶的平衡可调节微环境相互作用。
cathepsin H 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CTSH 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CTSH内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CTSH的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CTSH基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。