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cathepsin E双切口酶质粒(h) | sc-403406-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
cathepsin E双切口酶质粒(h2) | sc-403406-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CTSE 编码人源组织蛋白酶 E(cathepsin E),这是一种细胞内天冬氨酸蛋白酶,主要定位于内体和溶酶体区室,在内吞蛋白及肽抗原的蛋白水解加工过程中发挥作用。通过塑造内体-溶酶体蛋白酶网络,组织蛋白酶 E 影响抗原呈递、上皮稳态以及炎症信号传导,并在功能上与胃黏膜生物学和免疫细胞活化相关。已有研究在多种病理生理情境中报道 CTSE 表达及蛋白酶活性发生改变,包括黏膜损伤、炎症以及癌症相关的蛋白水解重塑。这些特征使 CTSE 成为研究溶酶体相关蛋白稳态(proteostasis)、抗原加工通路以及与疾病相关的蛋白酶失调的一个重要节点。
cathepsin E 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CTSE 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CTSE内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CTSE的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CTSE基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。