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caspase-12双切口酶质粒(m) | sc-419463-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
caspase-12双切口酶质粒(m2) | sc-419463-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Casp12 基因编码半胱天冬酶-12(caspase-12),这是一种半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶,与炎症信号调控及内质网(ER)应激反应相关。研究表明,caspase-12 参与调节半胱天冬酶的激活级联,并与先天免疫通路发生交叉,包括对微生物组分的应答以及炎性细胞因子信号传导。在小鼠体系中,Casp12 的活性与表达常在炎症相关组织损伤、宿主–病原体相互作用以及应激诱导的细胞凋亡背景下进行研究。这些过程的失衡与脓毒症样炎症、神经炎症和代谢应激等实验模型密切相关,在这些情况下,Casp12 可影响炎症输出与细胞存活之间的平衡。
caspase-12 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Casp12 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Casp12内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Casp12的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Casp12基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。