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casein kinase Iε双切口酶质粒(h) | sc-402163-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
casein kinase Iε双切口酶质粒(h2) | sc-402163-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CSNK1E 编码人源酪蛋白激酶 Iε(CK1ε),这是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,可对多种底物进行磷酸化,从而协调昼夜节律计时、受体转运以及信号转导。CK1ε 通过磷酸化 Dishevelled(Dvl)及该通路的其他组分,是 Wnt/β-连环蛋白信号通路的重要调节因子;同时,它也可通过磷酸化依赖的蛋白质周转参与 DNA 损伤应答与细胞周期控制。借由这些作用,CSNK1E 影响转录程序、蛋白稳定性以及细胞骨架动力学,从而塑造细胞增殖与分化。文献报道 CK1ε 活性失调与昼夜节律表型改变有关,并与多种疾病背景下观察到的信号失衡相关,包括癌症相关通路重编程。
casein kinase Iε 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CSNK1E 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CSNK1E内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CSNK1E的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CSNK1E基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。