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CARM1双切口酶质粒(h) | sc-404087-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CARM1双切口酶质粒(h2) | sc-404087-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CARM1(PRMT4)是一种蛋白精氨酸甲基转移酶,可催化组蛋白 H3 及非组蛋白底物的非对称二甲基化,从而协调对转录的表观遗传调控。通过对转录共激活因子和染色质相关因子进行甲基化修饰,CARM1 将多种信号输入整合到调控细胞周期进程、谱系决定以及 RNA 加工的程序中。它参与与核受体信号、雌激素受体共激活以及塑造增强子与启动子活性的染色质重塑复合体相关的转录调控通路。CARM1 的表达或活性失调与致癌性转录状态及异常分化程序有关,因此是癌症生物学与发育系统中开展机制研究的重要靶点。
CARM1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CARM1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CARM1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CARM1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CARM1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。