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Calregulin双切口酶质粒(m) | sc-419428-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Calr 基因编码钙网蛋白(calregulin),这是一种 Ca2+ 结合型分子伴侣,主要定位于内质网,通过钙连蛋白/钙网蛋白循环支持糖蛋白折叠与质量控制。钙网蛋白通过调控内质网 Ca2+ 稳态并与新生蛋白相互作用,影响内质网应激信号传导、未折叠蛋白反应(UPR)以及下游蛋白质稳态通路。当钙网蛋白暴露于细胞表面时,还可参与细胞黏附及与免疫相关的细胞外信号传递,从而与炎症相关过程相联系。在实验体系中,钙网蛋白功能失调与 Ca2+ 信号异常、蛋白质错误折叠应激,以及与肿瘤发生和造血功能障碍相关的表型有关联。
Calregulin 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Calr 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Calr内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Calr的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Calr基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。