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Calponin 1慢病毒激活颗粒(m) | sc-419719-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
Cnn1 编码 calponin 1(肌钙蛋白 1),这是一种肌动蛋白结合蛋白,在分化的平滑肌中富集,可调控肌动-肌球蛋白收缩性以及细胞骨架的组织。Calponin 1 通过与肌动蛋白丝和钙调蛋白的相互作用,参与应力纤维组装、黏着斑动态以及 Ca2+ 依赖性信号的调节,从而影响平滑肌张力和细胞运动性。CNN1 表达的改变常被用作平滑肌细胞表型转换的分子指标;该过程与血管重塑以及纤维化相关的收缩基因程序变化有关。在小鼠体系中,Cnn1 可作为通路功能读出,用于反映组织损伤应答过程中肌成纤维细胞样分化与细胞骨架重编程的调控。
Calponin 1 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Cnn1 表达。
Calponin 1 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Cnn1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Calponin 1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Cnn1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。