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CALML3双切口酶质粒(h) | sc-400954-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CALML3双切口酶质粒(h2) | sc-400954-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CALML3(calmodulin-like 3,钙调蛋白样蛋白3)编码一种可结合 Ca2+ 的 EF-hand 蛋白,作为钙传感器并调节钙调蛋白依赖性信号通路。该基因在上皮谱系细胞中富集,与细胞骨架重塑、细胞-细胞连接组织,以及影响增殖与分化的钙调控磷酸化网络相关。CALML3 通过调控 Ca2+ 依赖性酶和支架复合体,参与控制角质形成细胞成熟与上皮稳态的多条通路。已有研究报道其表达失调见于多种上皮相关病理状态(包括癌症),因此 CALML3 是研究钙信号如何重塑黏附与生长程序的一个有用靶点。
CALML3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CALML3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CALML3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CALML3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CALML3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。