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Cacna2d1双切口酶质粒(h) | sc-402833-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cacna2d1双切口酶质粒(h2) | sc-402833-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CACNA2D1 编码电压门控钙通道的 α2δ-1 辅助亚基,是调控通道转运、膜稳定性与门控的关键因子,从而塑造细胞兴奋性及刺激-分泌偶联过程中的钙内流。通过调节 CaV 钙通道功能,Cacna2d1 影响钙依赖性的信号级联反应,进而作用于神经递质释放、肌肉收缩以及活动依赖性的基因表达。CACNA2D1 表达改变或通道复合体调控异常,已与电生理失衡及重塑过程相关,这在神经科学与心血管研究中具有重要意义。作为通道复合体中暴露于细胞表面的组成部分,Cacna2d1 也有助于解析细胞外相互作用与翻译后修饰如何调节钙通道的可用性。
Cacna2d1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CACNA2D1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CACNA2D1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CACNA2D1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CACNA2D1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。