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CA XII双切口酶质粒(h) | sc-404149-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CA XII双切口酶质粒(h2) | sc-404149-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
碳酸酐酶 XII(CA XII)由人类 CA12 基因编码,是一种跨膜锌金属酶,催化 CO₂ 可逆水合生成碳酸氢盐和质子,从而支持细胞外及细胞周围的 pH 调控。通过将碳酸氢盐供应与质子处理耦联到膜转运过程,CA XII 参与细胞酸碱稳态、上皮离子转运,以及在氧气和营养条件变化下的代谢适应。CA12 的表达常在缺氧和代谢压力较大的微环境中发生失调;此时 pH 控制的改变可影响细胞黏附、迁移与信号传导。这些特征使 CA XII 成为研究 pH 依赖性通路及疾病相关组织生理改变的有用靶点。
CA XII 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CA12 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CA12内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CA12的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CA12基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。