Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CA III Antibody (G-5): sc-398912. Western blot analysis of CA III expression in human skeletal muscle (A), rat skeletal muscle (B) and mouse skeletal muscle (C) tissue extracts.
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CA III双切口酶质粒(h): sc-403538-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CA III 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CA III双切酶质粒（h）和CA III双切酶质粒（h2）编码针对CA3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CA III: sc-373729，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CA III双切口酶质粒(h) | sc-403538-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CA III双切口酶质粒(h2) | sc-403538-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 CA3 基因编码碳酸酐酶 III（CA III），这是一种位于细胞质的含锌金属酶，可催化 CO₂ 可逆水合生成碳酸氢盐和质子，从而支持细胞内 pH 调控以及 CO₂/HCO₃⁻ 缓冲。CA III 在氧化型骨骼肌中高表达，并可通过可发生 S-谷胱甘肽化修饰的反应性半胱氨酸残基参与维持氧化还原稳态，使其与细胞对氧化应激的反应相关联。通过调节酸碱平衡和氧化还原敏感过程，CA III 与肌肉生理相关的代谢调控及应激适应通路发生交叉。已有研究在肌肉功能障碍及代谢应激状态等背景下观察到 CA3 表达与 CA III 活性改变，因此它可作为研究细胞代谢与氧化损伤的有用标志物及关键机制节点。
CA III 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CA3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CA3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CA3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CA3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。