Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CA II Antibody (H-10): sc-133110. Western blot analysis of CA II expression in non-transfected: sc-117752 (A) and human CA II transfected: sc-113038 expression vector (B) 293T whole cell lysates.
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CA II双切口酶质粒(h): sc-401059-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CA II 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CA II双切酶质粒（h）和CA II双切酶质粒（h2）编码针对CA2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CA II: sc-48351，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CA II双切口酶质粒(h) | sc-401059-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CA II双切口酶质粒(h2) | sc-401059-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
碳酸酐酶II（CA II）由人类 CA2 基因编码，是一种活性很高的细胞质金属酶，催化 CO₂ 可逆水合生成碳酸氢盐和质子，从而支持细胞内 pH 调控以及 CO₂/碳酸氢盐转运。其活性与酸碱稳态和离子转运过程相耦联：通过与碳酸氢盐转运体及质子处理通路的功能性相互作用，影响缓冲能力与代谢通量。CA2 广泛表达，且常被用作红细胞、肾脏以及与骨相关细胞类型中碳酸酐酶生物学的标志物；在这些细胞中，碳酸氢盐化学的紊乱可改变细胞生理。CA2 的变异或表达异常与酸碱平衡障碍及矿化相关表型有关，因此它是研究 pH 依赖性信号与代谢机制的一个有价值的基因位点。
CA II 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CA2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CA2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CA2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CA2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。