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C6orf141CRISPR激活质粒(h) | sc-418416-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
C6orf141(人类)编码一种表征不足的蛋白质,功能注释非常有限;现有证据提示它可能更倾向于参与细胞类型特异性的调控程序,而非核心代谢通路。转录组数据集显示其在不同组织和发育背景中的表达存在差异,这支持进一步探究其在转录调控、细胞分化或应激适应过程中的潜在作用。由于机制性数据仍然稀缺,C6orf141 常作为未表征的开放阅读框(ORF)进行研究,用于绘制蛋白互作网络、确定亚细胞定位以及解析下游基因特征表达谱。部分疾病组学研究中观察到其表达模式发生改变,这促使研究者探索其与基因表达失衡状态的潜在关联,同时避免对因果关系作出预设。
C6orf141 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性C6orf141的表达。
C6orf141 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的C6orf141基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于C6orf141转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性C6orf141表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的C6orf141位点,并能够研究内源性位点上依赖于C6orf141的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在C6orf141表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟C6orf141通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。