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C3慢病毒激活颗粒(m2) | sc-419391-LAC-2 | 200 µl | CNY3422.00 |
小鼠C3基因编码补体成分3(C3),它是补体级联反应的核心枢纽,可在蛋白水解作用下被加工为C3a和C3b,通过经典途径、凝集素途径和旁路途径驱动调理作用、免疫细胞募集,并放大先天免疫反应;C3的激活有助于清除病原体和免疫复合物,调控与凝血及炎症信号通路的串扰,并通过影响吞噬作用和细胞因子产生来塑造组织稳态;C3活性失衡与补体介导的炎症和免疫复合物相关病理密切相关,涉及自身免疫、感染及神经炎症过程等模型;在小鼠体系中对C3进行基因编辑可用于在体内及原代免疫细胞实验中开展补体激活机制、受体-配体相互作用及其功能结局的研究。
C3 慢病毒激活颗粒(m2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 C3 表达。
C3 慢病毒激活颗粒(m2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在C3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性C3表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 C3 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。