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C23 (Nucleolin)双切口酶质粒(h) | sc-400191-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
C23 (Nucleolin)双切口酶质粒(h2) | sc-400191-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NCL 编码 C23(核仁蛋白 nucleolin),这是一种在核仁中高丰度表达的 RNA 结合蛋白,可通过 rDNA 转录、pre-rRNA 加工以及核糖核蛋白复合体组装来协调核糖体生物发生。除核仁之外,nucleolin 还参与 mRNA 稳定性调控、染色质组织、DNA 损伤应答以及核-胞质转运,从而与调控细胞生长和应激适应的多条通路相联系。NCL 的表达水平、亚细胞定位或翻译后修饰发生改变,与增殖失衡、基因组维护受损以及翻译程序改变有关,并在包括癌症和神经退行性疾病在内的多种疾病背景中被观察到。作为一种多功能支架蛋白,C23 因其在核仁应激信号传导和 RNA 代谢调控中的作用而被广泛研究。
C23 (Nucleolin) 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NCL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NCL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NCL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NCL基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。