Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
C22orf25 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-414343
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- C22orf25 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在C22orf25基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
C22orf25 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-414343 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
TANGO2（C22orf25）编码一种保守蛋白，参与细胞能量稳态调控；已有研究提示其作用可能将线粒体功能以及内质网–高尔基体运输与更广泛的代谢协同联系起来。TANGO2 活性缺失与氧化代谢紊乱和细胞应激反应异常相关，这与线粒体动力学改变以及对分解代谢需求更为敏感等观察结果一致。在人体生物学研究中，TANGO2 最常见于神经代谢相关表型的背景下被探讨，即能量处理受损会影响高能量需求组织。因此，TANGO2 是解析细胞内运输、线粒体生理与应激适应通路之间机制联系的一个有价值靶点。
C22orf25 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中TANGO2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对TANGO2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏TANGO2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使C22orf25蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建TANGO2缺失的细胞模型，用于C22orf25信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 C22orf25 功能至关重要的 TANGO2 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 TANGO2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 C22orf25 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 C22orf25 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 TANGO2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 C22orf25 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 C22orf25 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由TANGO2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定TANGO2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。