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C1qL2CRISPR激活质粒(m) | sc-432618-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
C1qL2CRISPR激活质粒(m2) | sc-432618-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
C1ql2 编码 C1qL2,这是一种分泌型的 C1q/TNF 超家族蛋白,在神经系统中富集,并与突触组织和神经元通信有关。C1qL2 可通过与受体介导的信号传导相互作用充当突触组织因子,从而影响兴奋性回路连接、神经突起形态模式以及活动依赖性可塑性。由于其在突触处介导细胞外信号传递的作用,C1ql2 常被用于研究与神经发育和网络重塑相关的通路,并与认知及神经精神表型的潜在机制相关。在小鼠模型中,对 C1ql2 表达的调控有助于探究补体样蛋白如何塑造突触维持与神经回路功能。
C1qL2 CRISPR激活质粒(m)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性C1ql2的表达。
C1qL2 CRISPR激活质粒(m)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的C1ql2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于C1ql2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性C1qL2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的C1ql2位点,并能够研究内源性位点上依赖于C1qL2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在C1ql2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟C1qL2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。